Cómo hacer Crecer las Bacterias Del Suelo

Como hacer Crecer las Bacterias Del Suelo

Un numero de metodos que existen para el estudio de las comunidades microbianas en el suelo. Una tecnica es crecer un amplio espectro de bacterias que viven en el suelo. Para lograr esto, un medio que promueve el crecimiento de un gran numero de especies bacterianas (lo que se denomina "no selectivo") es necesario. Es una eleccion popular Agar nutritivo, que es comercialmente disponibles o pueden ser creados a partir de extracto de carne, peptona agar. Diluciones seriadas se hacen a menudo de las muestras de suelo para crear manejable colonias de la cultura para facilitar aun mas la investigacion.

Un numero de metodos que existen para el estudio de las comunidades microbianas en el suelo. Una tecnica es crecer un amplio espectro de bacterias que viven en el suelo. Para lograr esto, un medio que promueve el crecimiento de un gran numero de especies bacterianas (lo que se denomina 'no selectivo') es necesario. Es una eleccion popular Agar nutritivo, que es comercialmente disponibles o pueden ser creados a partir de extracto de carne, peptona agar. Diluciones seriadas se hacen a menudo de las muestras de suelo para crear manejable colonias de la cultura para facilitar aun mas la investigacion.
Cosas Que necesitara

• Esteril dispositivos de muestreo (modificado jeringas, sacatestigos, etc.)
• Tierra
• placas de Petri
• tubos de Ensayo

• 250 ml matraz
• tampon Fosfato salino
• Agar nutritivo
• Esteriles pipetas

Recoleccion de Muestras

• Determinar el suelo-procedimiento de muestreo, incluyendo el tamaño de la muestra, la ubicacion (vertical y horizontal) y la frecuencia de las muestras deben ser tomadas. Una forma muy sencilla de suelo-procedimiento de muestreo podria ser una individual, 2 ml de la muestra de superficie de suelo tomadas en un pastizal en un dia en particular.
• Cobrar el deseado de muestras de suelo, garantizando la no contaminacion de las muestras. Una jeringa desechable de plastico puede ser modificado en una excelente herramienta de muestreo mediante la eliminacion de la punta y la esterilizacion de la jeringa. Una ventaja añadida de este dispositivo es la facilidad con la que los tamaños de las muestras se pueden medir volumetricamente.
• Almacenar las muestras a temperatura ambiente hasta que este listo para ser cultivadas. Las muestras deben ser cultivadas dentro de las 72 horas de su recoleccion.

Preparacion de Diluciones

• Añadir un gramo de la muestra de suelo a 99 ml de Tampon Fosfato Salino (PBS). Esto creara una dilucion 1/100 de la muestra de suelo y el recipiente debe ser debidamente etiquetados.
• Revuelva o agite la solucion vigorosamente durante al menos un minuto. La intencion de la agitacion es suspender los organismos en la solucion.
• Permitir que el suelo de material particulado para resolver durante 15 minutos. Decantar la porcion de liquido en tubos de ensayo rotulados con la muestra adecuada y la dilucion 1/100).
• la Transferencia de un mililitro de la dilucion 1/100 en un tubo de ensayo que contiene 9 ml de PBS utilizando una pipeta esteril. Esto creara un 1/1000 de la dilucion de la muestra. Agitar el tubo de ensayo hasta que la muestra este bien mezclado, y asegurarse de que la muestra esta etiquetado con la muestra adecuada y la dilucion.
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• la Transferencia de un mililitro de la dilucion 1/1000 en un tubo de ensayo que contiene 9 ml de PBS utilizando una pipeta esteril. Esto creara un 1/10,000 de dilucion de la muestra. Agitar el tubo de ensayo hasta que la muestra este bien mezclado, y asegurarse de que la muestra esta etiquetado con la muestra adecuada y la dilucion. Adicional diluciones pueden ser creados a medida que sea necesario repetir el proceso en los Pasos 4 y 5.

el Cultivo

• Preparar las placas de petri para el cultivo mediante el vertido termico (45 grados C) Agar nutritivo esteril en placas de petri hasta la parte inferior de la placa esta cubierta. Añadir un mililitro de la dilucion 1/100 a la placa.
• agite Suavemente el agar en la parte inferior de la placa a medida que se enfria. La etiqueta de la placa con la muestra correspondiente y a la dilucion 1/100).
• Repita los pasos 1 y 2 para cada muestra y la dilucion, asegurandose de que la placa este debidamente etiquetados.
• Tapa de las placas y de invertir ellos una vez que el agar se ha solidificado en la parte inferior de la placa. Permitir que las placas para dos dias a temperatura ambiente.
• Examinar las placas y realizar cualquier analisis adicional.

Consejos & Advertencias

• las Desviaciones en los metodos de muestreo, la dilucion de soluciones y medios de cultivo puede ser necesaria en algunas situaciones y la cultura a los mas exigentes bacterias.
• Este metodo puede facilitar el crecimiento de muchos de los hongos del suelo, asi como las bacterias.